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熒光定量PCR儀的部分試驗(yàn)指南

更新時(shí)間:2017-08-30瀏覽:2168次
  影響熒光定量PCR儀試驗(yàn)的因素非常之多,有時(shí)很難區(qū)分是什么導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不佳。降低實(shí)驗(yàn)的不穩(wěn)定因素是使用可靠的產(chǎn)品。使用、性能可靠的熱啟動(dòng)酶、的dNTP、Mg離子、UNG/dUTP防污染系統(tǒng)預(yù)混成的熒光定量PCR儀試劑體系,大程度的降低了反應(yīng)變量,提高了實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性和可靠性。還需要進(jìn)行以下步驟的準(zhǔn)備:設(shè)計(jì)引物和探針、合成引物和探針、正確儲(chǔ)藏、得到高質(zhì)量的模板,隨后,僅需要進(jìn)行退火溫度的優(yōu)化,就能得到好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
  熒光定量PCR儀是快速增長(zhǎng)的PCR方法,它可以、可重復(fù)地定量起始物質(zhì)。hot start是一種方便使用的反應(yīng)混合液,為定量分析進(jìn)行了優(yōu)化。它包含了熒光PCR所必須的成分(如緩沖液,dNTP,聚合酶)。只需加入模板,擴(kuò)增引物和熒光標(biāo)記探針。就可以得到實(shí)時(shí)qPCR所需的特異性和靈活性。
  可以利用成套的hot start Taq酶,來(lái)配制不含有UNG/dUTP防污染系統(tǒng)的熱啟動(dòng)熒光PCR體系。
  也可以選擇hot start Taq酶,UNG酶和dNTPS,來(lái)配制含有UNG/dUTP防污染系統(tǒng)的熱啟動(dòng)熒光PCR體系??梢詮膶?shí)驗(yàn)角度得到多種選擇,得到高產(chǎn)量、特異和靈活的定量PCR試劑體系。
  高度靈活性:
  除了靈敏度和特異性外,PCR試劑體系檢測(cè)方法和設(shè)備上給您提供了較高的自由度。
  對(duì)擴(kuò)增的不同模板優(yōu)化鎂離子濃度,由于提供了附加的氯化鎂,所以您可以方便地配置Mix體系。
  可以更靈活的進(jìn)行普通PCR和熒光定量PCR儀。
  可以在多種設(shè)備上使用。
  可以利用多種檢測(cè)方法的優(yōu)點(diǎn),不必局限于特定的試劑盒。
  還可以靈活的選擇進(jìn)行自配熒光PCR體系,不論是含UNG/dUTP防污染系統(tǒng)還是不含該系統(tǒng)的。
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